HyCyte®类器官传代消化液(Organoid Digestion Solution )可应用于多种哺乳动物(如人、鼠) 来源类器官的常规传代, 可使类器官从基质胶中分离, 并可使其温和地消化为小细胞簇或单细胞,同时保持其传代后的生长活力。
产品名称:HyCyte®类器官传代消化液
产品货号:GUTP-R004
产品规格:100 mL / 500 mL
保存条件:冰袋运输。-20ºC保存,有效期12个月。
质检标准:经过严格的无菌检测、内毒素检测,确保产品不含细菌、真菌、支原体污染。
| 使用方法
1. 弃去培养基,每孔加入1 mL 4 ℃预冷的传代缓冲液,使用1000uL枪头吹散或刮下基质胶,收集至15mL离心管中,每管补充体积至10 mL。(每6-8 孔为一组)。将离心管放入4 ℃冰箱静置15-30分钟。
2. 300 g离心5分钟,弃上清。加入1-2 mL类器官传代消化液,重悬后室温消化,每隔1分钟吹打一次,吹打时观察到无明显颗粒,或在显微镜下观察直至出现2-10个细胞的细胞团时,即可停止。
3. 加入3倍类器官消化液体积的传代缓冲液终止消化,收集类器官于15 mL离心管。
4. 300 g离心5分钟,弃上清。
5. 将上步骤所获类器官沉淀可用于后续类器官培养、冻存等实验操作。
| 注意事项
1. 所有操作均需在无菌环境下进行。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存。
3. 在此操作过程中须仔细监测消化过程,避免过度消化。在消化过程中,使用移液器吹打混匀帮助消化。也可实时取少量消化悬液于显微镜下观察消化情况, 当观察到较多的单细胞或直径在50μm 以下的细胞簇后,即可认为消化完成。
4. 在确认消化完成的悬液中, 加入至少3倍体积的类器官缓冲液进行稀释, 从而终止消化作用。