细胞扩增服务介绍

海星具有丰富的细胞培养经验，目前有3000+细胞株的培养经验，有400+肿瘤细胞株的培养经验，拥有大量的细胞种质资源，从人、大小鼠、仓鼠及其它动物的原代细胞、干细胞、转化细胞系及肿瘤细胞系都做过细胞培养服务。我司提供的细胞扩增服务，承诺交付的细胞状态良好，无支原体，无微生物污染，提供足够的数量和完整性的质检报告。

细胞培养服务流程

客户提供相应细胞株或免费使用我公司实验室细胞株（3000+细胞株）
进行大量培养或连续传代培养
提供足量的活细胞或冻存管细胞或细胞沉淀或基因组DNA

细胞培养服务特性

细胞状态好，无支原体，无微生物污染
人源细胞提供STR鉴定报告，鼠源细胞提供种属鉴定报告
选择合适的培养基，满足细胞增殖和功能要求
实时监测细胞培养条件，以保持适宜细胞生长环境

交付承诺

细胞状态良好，无支原体，无微生物污染，足够的数量和完整性的质检报告

技术方法介绍

为了满足批量生产的需求，以及进行良好的生产和质量控制，大量的细胞培养技术被开发，具体到使用方法上，包括转瓶培养、细胞工厂和生物反应器。

（1）转瓶培养

转瓶培养适用于贴壁细胞和悬浮细胞从小量培养到大规模培养的过渡阶段，它能为细胞提供较大的生长面积。贴壁细胞附着在培养瓶，经转动可使细胞交替接触培养液和空气，有利于细胞营养代谢和细胞呼吸。若需增加细胞产量，除可在增加转瓶的数量和容积外，减少培养瓶直径，可增加比表面积。

转瓶培养具有操作简单，成本低，技术成熟，扩增只需加转瓶数量等优点；还可随时观察监测细胞生长状态；由于单位细胞生长面积的营养量较大，转瓶培养更有利于收集细胞的代谢产物。

图1 大规模悬浮细胞培养

（2）细胞工厂

细胞工厂是一种在有限空间内**限度利用培养表面的细胞培养容器，它能节省空间成本，实现扩大产能的目的。简单来说就是从“平房”迁居“别墅”。该方法单次操作，就可以收获数倍培养面积的细胞。

细胞工厂特别适合于贴壁和悬浮细胞的大规模培养，包括CHO、Vero、MRC-5，2BS、293T、,L929及人二倍体细胞等。细胞工厂培养受污染风险低，产率高，占用空间小，瓶间差异小，能降低企业的质控成本和下游纯化成本。

图2 大规模贴壁细胞培养

（3）微载体培养

微载体培养是固定化培养的代表。此方法是将微载体添加到培养液中作为载体，使细胞在微载体表面附着生长，同时加以搅拌使细胞始终保持悬浮状态。微载体培养充分结合了贴壁培养和悬浮培养各自的优势，使得贴壁细胞也能在悬浮状态下实现扩大培养。

微载体细胞培养技术主要应用于生物反应器，该方法简化了细胞生长各种环境因素的检测和控制，重现性好，可用简单的显微镜观察细胞在微珠表面的生长情况，且培养基利用率高，增加了比表面积，能大大提高细胞产率而无需凭借大容量的设备，节省了占地面积和空间，降低成本。

图3 Cytodex 1 Gamma 微载体（无菌、干粉）

案例

1. 干细胞大规模培养

100x

40x

2.干细胞表型分析

细胞表面标记

3.大规模扩增

4. 流式检测数据

细胞培养14d后的流式检测数据

细胞培养21d后的流式检测数据

5.肿瘤细胞系扩增

人肝癌细胞(HepG2、HuH-7)扩增图片

HepG2

HuH-7

人非小细胞肺癌细胞(A549、NCI-H1299)扩增图片

A549

NCI-H1299

人乳腺癌细胞(MCF-7、 MDA-MB-231)扩增图片

MCF-7

MDA-MB-231

人结肠癌细胞(HCT116、SW480)扩增图片

HCT116

SW480

人卵巢癌细胞(OVCAR-8、SK-OV-3)扩增图片

OVCAR-8

SK-OV-3

人胶质瘤细胞(U251、H4)扩增图片

U251

H4

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