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产品简介
脂肪间充质干细胞在诱导培养基的作用下,会逐渐分化成前成脂细胞和脂肪细胞,将形成大小不一的脂滴。油红O在脂肪中的溶解度大于其在染液中的溶解度,从而使脂肪着色呈现红色或橘红色。产品适用于脂肪间充质干细胞成脂诱导,能显著提高诱导效率。
产品特点
产品性能稳定,可显著提高脂肪间充质干细胞成脂诱导效率;
含染色液,方便使用;即用型产品开封即可使用,更省时省力。
NOTE: 间充质干细胞的成脂分化水平因细胞类型、细胞供体来源,培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。
| 举例说明:成脂诱导步骤
(以下步骤仅供参考,详情参见说明书)
1.接种脂肪间充质干细胞:取对数生长期的细胞,按照2×10^4cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中,于37℃,5% CO2培养环境下培养至汇合度90-100%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。
2. 细胞分化诱导:于37℃,5%CO2培养环境下培养约3天,更换为成脂诱导分化培养基维持液,培养1天后,再更换为成脂诱导分化培养基诱导液,继续培养3天。
按照以上换液频率诱导14-21天,并注意观察细胞形态变化。根据细胞诱导形成的脂滴数量和大小,决定终止细胞诱导的时间,并进行染色鉴定。
3. 细胞固定:吸去培养基,使用适量1×PBS清洗一次,弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室温固定30-60min,弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
4. 油红O染色:取生理盐水或1×PBS与油红O原液配制油红O工作液(油红O原液: 生理盐水=3:2),现用现配。
向清洗干净的诱导孔内加入适量工作液,静置染色30min;吸走油红O工作液,用1×PBS清洗两次,并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
5. 诱导评估:显微镜下观察成脂染色效果,并进行图像采集和诱导评估;诱导成功时,脂滴会与油红O染料结合后呈现红色或橘红色。