产品说明书下载
产品简介
HyCyte™骨髓间充质干细胞在诱导培养基的刺激下,会逐渐向骨细胞方向分化,产生明显的泌钙反应,形成钙盐结晶或钙质结节,从而被茜素红染色;产品适用于骨髓间充质干细胞成骨诱导,能显著提高诱导效率。
产品特点
产品性能稳定,可显著提高间充质干细胞诱导效率;
含染色液,方便使用;即用型产品,开封即可使用,更省时省力。
| 举例说明:成脂诱导步骤
(以下步骤仅供参考,详情参见说明书)
1.接种诱导细胞:取对数生长期的细胞,按照2×10^4cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中,于37℃,5% CO2培养环境下培养至汇合度90-100%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。
2. 细胞分化诱导:于37℃,5% CO2培养环境下培养约3天,更换为成脂诱导分化培养基维持液,培养1天后,再更换为成脂诱导分化培养基诱导液,继续培养3天。
按照以上换液频率诱导14-21天,并注意观察细胞形态变化。根据细胞诱导形成的脂滴数量和大小,决定终止细胞诱导的时间,并进行染色鉴定。
3. 细胞固定:吸去培养基,使用适量1×PBS清洗一次,弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室温固定30-60min,弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
4. 油红O染色:取生理盐水或1×PBS与油红O原液配制油红O工作液(油红O原液: 生理盐水=3:2),现用现配。
向清洗干净的诱导孔内加入适量工作液,静置染色30min;吸走油红O工作液,用1×PBS清洗两次,并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
5. 诱导评估:显微镜下观察成脂染色效果,并进行图像采集和诱导评估;诱导成功时,脂滴会与油红O染料结合后呈现红色或橘红色。