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产品简介
HyCyte™骨髓间充质干细胞在诱导培养基的刺激下,会逐渐向骨细胞方向分化,产生明显的泌钙反应,形成钙盐结晶或钙质结节,从而被茜素红染色;产品适用于骨髓间充质干细胞成骨诱导,能显著提高诱导效率。
产品特点
产品性能稳定,可显著提高骨髓间充质干细胞成骨诱导效率;
含染色液,方便使用;即用型产品,开封即可使用,更省时省力。
NOTE:间充质干细胞的成骨分化水平因细胞类型、细胞供体来源,培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。
| 举例说明:成骨诱导步骤
(以下步骤仅供参考,详情参见说明书)
1. 接种骨髓间充质干细胞:取对数生长期的细胞,按照2×104cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中,于37℃,5% CO2培养环境下培养至汇合度60-70%,弃掉上清,加入成骨诱导分化培养基。
2. 细胞分化诱导:每2-3天更换成骨诱导培养基,于37℃,5% CO2培养环境下培养约14-21天,并注意观察细胞形态变化。根据细胞钙盐结晶析出和钙质结节形成的情况,决定终止细胞诱导的时间,进行染色鉴定。
3. 细胞固定:吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次,弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室温固定30-60 min,弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
4. 茜素红染色:加入适量茜素红染液染3~5min,吸去茜素红染液,用1×PBS清洗两次,并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
5. 诱导评估:显微镜下观察成骨染色效果,并进行图像采集和诱导评估。诱导成功时,钙质结节会与茜素红染料结合后呈现红色或橘红色。