发货周期:
干冰冻存管运输3天(1x106cells/冻存管x2)
常温运温1-2周发货 (1x106 cells/T25培养瓶)
(推荐T25瓶,复苏发货1-2周)
SH-SY5Y细胞是于1970年建自骨瘤转移灶的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系经3次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。SH-SY5Y细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性
细胞名称:人神经母细胞瘤细胞(STR鉴定正确)
细胞简称:SH-SY5Y
产品货号:TCH-C325
种属来源:人
组织来源:脑
疾病特征:脑神经母细胞瘤
细胞形态:上皮样
生长特性:半贴半悬
培养体系:DMEM/F12+15% FBS+1% P/S
配套培养基货号:TCH-G325
传代比例:1:3-1:4,每2-3天换液一次
传代周期:48-72h
培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃
冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存
质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性
SH-SY5Y 已发表过的文章:
IF=3.6 Mengzhen Z, Xinwei H, Zeheng T, et al. Integrated machine learning-driven disulfidptosis profiling: CYFIP1 and EMILIN1 as therapeutic nodes in neuroblastoma[J]. Journal of Cancer Research and Clinical Oncology, 2024, 150(3): 109.
SH-SY5Y细胞培养常见问题及解决方案
SH-SY5Y细胞生长特性:上皮细胞样,贴壁细胞,极少量悬浮;
SH-SY5Y细胞培养时,贴壁细胞和悬浮细胞同时存在,贴壁细胞呈上皮样,有短触角延伸出来,倾向于成簇生长,容易成团。
SH-SY5Y细胞生长缓慢,成簇生长,贴壁性差,容易聚团,培养 2~3 天后细胞可正常贴 壁;接种或传代后少动少换液,48 h 内尽量勿动;聚团现象多为胰酶消化不当,或铺瓶不 匀导致,建议消化后重铺。
1. SH-SY5Y细胞生长较缓慢。在培养过程中,有以下几点需要注意:
(1)能否使用DMEM/F12
MEM/F12和DMEM/F12都可以培养SH-SY5Y,并且都有相应的文献支持。但这两种培养基培养出来的形态会有细微差异。
另外,使用品质好的胎牛血清将极大改善细胞生长状态。
(2)培养基容易变黄
因其神经母细胞瘤的特性,SH-SY5Y细胞成簇生长,饱和密度大。
有时显微镜下看着密度不高,但细胞簇实际密度大,所以培养基很快就变黄了。这时候,需及时换液。
(3)生长异常缓慢
当细胞培养一周都无法传代时,可以将细胞消化下来,接种到更小的容器中,人为增加细胞密度,从而促进细胞生长。
平时传代时也要注意接种密度不能太低。
(4) 传代注意事项
不建议连续消化细胞,连续消化细胞会导致细胞状态变差。
传代时消化时间不宜过长,通常1-3min即可,若细胞解离太快可适当用PBS稀释胰酶。
吹打细胞时,动作轻缓一些,减少对细胞的物理刺激。
2. 异常情况:
(1)悬浮细胞过多
有文献报道,SH-SY5Y在悬浮状态也能维持生长。
SH-SY5Y生长时,大部分为贴壁细胞,少量为悬浮细胞。 如果SH-SY5Y出现大量悬浮的细胞,就需要引起注意了。
处理办法
· 换液时将悬浮细胞离心收集,新鲜培养基重悬后接种回原瓶/原皿。
· 当贴壁细胞生长状态良好、密度适中时,可以舍弃悬浮细胞。
(2)成团严重
另外,SH-SY5Y细胞非常敏感,在受到温度、化学或物理刺激后容易出现成团现象。
一个视野下,有少量成团现象,无需特殊处理。成团严重,几乎没有铺展开的细胞并且培养数天未展开时,就需要按以下方法特殊处理一下了。
成团较严重的SH-SY5Y细胞处理办法
方法一: 低密度接种,用胰蛋白酶消化细胞(不超过5min),按1:6比例传代接种,并换新的培养器皿。延长换液时间,3天换液一次,防止细胞脱落。
方法二: 使用多聚赖氨酸包被的培养器皿,以加快细胞贴壁速度,降低细胞聚集成团的几率。
方法三: 重新铺板,并更换新配制的培养基,并加大血清比例(不超过20%)。
方法四: 接种时,减少培养基量(如T25加3mL)以加快细胞贴壁速度,等待细胞贴壁后(约8-12小时),再补加培养基。
(3)预防成团的方法
· 控制细胞密度不超过80%,当密度到达或超过80%及时传代;传代时切勿暴力吹打,避免对细胞造成机械刺激。
· 使用质量好的培养基和胎牛血清,减少内毒素等有害物质对细胞的刺激。
· 请勿频繁把细胞从培养箱拿出,气温低时需开暖气维持细胞房温度;使用PBS、培养基前37度预热,以避免温差对细胞造成刺激。
收货当天如何处理细胞?
收到细胞后请务必仔细阅读产品资料,了解细胞相关信息,如贴壁特性 (贴壁/悬浮/半贴壁半悬浮)、细胞形态、培养体系、传代比例和换液频率等。