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HK-2细胞属源于正常肾的近曲小管细胞,通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2;Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317,最后将PA317细胞产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示,HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实,HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。
细胞名称:人肾皮质近曲小管上皮细胞(STR鉴定正确)
细胞简称:HK-2
产品货号:TCH-C400
种属来源:人
组织来源:肾
疾病特征:--
细胞形态:上皮细胞样
生长特性:贴壁生长
培养体系:MEM+10% FBS+1% P/S
配套培养基货号:TCH-G400
传代比例:1:3-1:4,每2-3天换液一次
传代周期:24-48 h
培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃
冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存
质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性
HK-2 已发表过的文章:
IF=5.8 Feng W, Zhu N, Xia Y, et al. Melanin-like nanoparticles alleviate ischemia-reperfusion injury in the kidney by scavenging reactive oxygen species and suppressing ferroptosis[J]. iScience, 2024.
IF=4.8 Jia K, Shi P, Zhang L, Yan X, Xu J, Liao K. Trans-cinnamic acid alleviates high-fat diet-induced renal injury via JNK/ERK/P38 MAPK pathway. J Nutr Biochem. 2025 Jan;135:109769.
IF=4.5 Peng L, Wang C, Yu S, et al. Dysregulated lipid metabolism is associated with kidney allograft fibrosis[J]. Lipids in Health and Disease, 2024, 23(1): 37.
IF=3.9 Li X, Shi C, Zhou R, et al. Modified EBP‐bFGF targeting endogenous renal extracellular matrix protects against renal ischemia‐reperfusion injury in rats[J]. Journal of Biomedical Materials Research Part A, 2024.
HK-2细胞培养常见问题及解决方案
1. 出现空泡
空泡问题需要结合生长速度和形态来看:如果生长速度和形态正常,空泡可能是正常的细胞活动,传代后空泡即可减轻。
如果生长较慢,形态异常,空泡可能是自噬行为,可加大血清比例(不超过20%)或更换血清品牌改善细胞状态。
2. 出现拉丝
细胞伸出细长的丝有两种情况:
**种:细胞迁移造成的,细胞在培养皿上并不是静态的,也会出现迁移。迁移时细胞的一部分滞留在原处,迁移的过程中会拉出一条细长的丝。这种情况下拉丝的细胞占少数,细胞整体的生长状态是正常的,不用特殊处理。
第二种:细胞营养不良,拉丝的细胞占大多数,同时细胞生长缓慢,此时可以提高血清比例(不超过20%)或添加5 ng/mL EGF。
3. 形态不对
正常的HK-2呈铺路石状生长,如果细胞呈镰刀状或不规则状,可能是因为培养环境发生了较大的改变,比如从有血清到无血清的转换,此时换回原来的培养条件细胞可逐渐恢复;如果细胞变得细长,这时候可能是营养不良。
4. 生长缓慢
在标准培养条件(MEM+10%FBS+1%PS),以及1:3传代条件下,HK-2的传代周期约为3天;
当细胞生长缓慢,一周无法传代时,需要考虑培养基特别是血清是否合适;
选择合适的培养基及血清,同时加大细胞接种密度可以改善;
血清质量差异可能引起细胞状态变化,建议选用高质量的胎牛血清。
收货当天如何处理细胞?
收到细胞后请务必仔细阅读产品资料,了解细胞相关信息,如贴壁特性 (贴壁/悬浮/半贴壁半悬浮)、细胞形态、培养体系、传代比例和换液频率等。