| 产品介绍
第二代HyCyteTM基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)是基于海星生物的位点特异性SSR重组酶技术开发的基因干扰稳转试剂盒。
| 产品特点
利用SSR (Site-specific Recombinase)重组酶实现干扰序列载体高效稳转,大幅提升了干扰效率。试剂盒的转染操作与siRNA转染操作一样,构建与病毒一样的基因干扰稳转细胞株,是新一代的基因干扰技术产品。
干扰试剂盒包括了人(Human)和小鼠(Mouse)基因组的所有基因,shRNAx2.0试剂盒包含2个优选的shRNA干扰序列载体、1个表达GFP/对照shRNA干扰序列载体和1管位点特异性SSR重组酶,通过SSR重组酶高效催化shRNA载体整合到细胞的基因组中,实现shRNA片段的细胞稳转效果;同时由于SSR重组酶整合效率极高,shRNA片段在目的细胞基因组大约含有10~100个拷贝,高拷贝数大幅提升了shRNA片段的表达效果,从而提升了基因的干扰效果。shRNAx2.0载体包含有puro抗性基因和GFP荧光基因,可以轻松通过荧光判断干扰载体的转染效率和目的载体表达效率,并通过Puromycin药物筛选,获得高表达的细胞株,轻松建立基因干扰稳转细胞株。shRNAx2.0干扰稳转试剂盒的操作与siRNA转染过程一样简单,对各种细胞都有非常好的干扰效果,也适用于间充质干细胞(MSCs)等的基因功能研究。
| 产品优势
比病毒法更简单——对分裂细胞和非分裂细胞都有非常好的干扰效果
细胞稳转效率高——仅需1~2周便可以拿到长期稳定干扰的细胞株
| 产品构成
| 产品原理
HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)的干扰效率与传统病毒法干扰效率相当。因其独有SSR重组酶可以构建高拷贝“稳转”细胞株,同时可以通过药物筛选到高效、稳定的干扰稳转细胞株。shRNAx2.0试剂盒是除了病毒法之外**可以轻松获得稳定干扰的稳转细胞株的实验方案。
使用HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)构建干扰稳转株的周期仅1~2周,便可以拿到长期稳定干扰的细胞株,是大幅提升实验速度的方案。
| 应用流程
HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)操作步骤(脂质体转染法):
本试剂盒可以采用的转染试剂是Lipofectamine® 2000 Reagent (cat#11668-030),具体参照转染试剂每种细胞情况。不同类型的转染试剂,请按照制造商的操作说明进行转染。
注意:悬浮细胞不推荐使用脂质体转染法。
HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)操作步骤(电转化法):
本试剂盒可以Neon转染系统,具体参照设备对每种细胞参数。不同类型的电转设备,请按照制造商的操作说明进行优化。
注意:悬浮细胞推荐使用电转化法。
HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)配有GFP对照shRNA载体,可以按照实际使用的方法和细胞情况,进行实验摸索,建议48小时后的目的细胞的GFP的阳性率不低于50%, shRNAx2.0试剂盒才能获得**效果。
HyCyte™基因干扰试剂盒检索数据库
下单操作流程:
1、打开链接,选择对应的物种(人、小鼠、大鼠);
2、输入基因ID或者基因名称进行检索;
3、获得对应的产品名称和货号信息:例如,人NOL4L基因干扰稳转试剂盒(GeneID: 140688) Cat.No.: RD500001;
4、下单将此产品信息和货号作为:给卖家留言,填入信息。
5、提交订单!