在细胞治疗和再生医学快速发展的当下，干细胞作为“种子细胞”的长期稳定保存，已成为决定科研与临床转化成败的关键环节。然而，干细胞对冻存环境极为敏感——冻存液配方不当、降温速率不稳或血清成分引入的外源风险，都可能导致细胞膜损伤、活性骤降，甚至丧失干性（自我更新与分化能力）。理想的干细胞冻存方案，需要在**限度维持复苏存活率与保障后续应用安全性之间取得平衡：既要防止冰晶损伤和渗透压冲击，又要避免动物源成分带来的病毒污染或免疫排斥风险。此外，不同细胞类型对冻存条件差异显著，配方设计若缺乏针对性，复苏效果往往大打折扣。

HyCyte^®海星干细胞专研一步冻存液（SCCP-R201），是海星技术团队针对干细胞的独特膜结构及干性维持需求而开发。该产品能有效降低冻存过程中对细胞膜的损伤，实现高复苏存活率（>90%）及长达15年以上的稳定保存。使用时无需程序降温仪或特殊设备，重悬细胞后直接置于-80°C冰箱即可完成“一步冻存”，极大简化操作流程。配方为无血清、无动物蛋白的化学限定体系，从源头杜绝外源因子污染风险，契合干细胞临床前研究与合规性要求。

| HyCyte^®干细胞专研一步冻存液产品特点

• 无需程序降温，-80°C一步冻存

• 无血清、无任何蛋白，成分明确

• 高复苏率>90%

• 保留干细胞关键特性：增殖能力与多向分化潜能不变

• GMP级、稳定性高

• 即用型液体，无需配制或过滤

• 每批次产品均通过无菌、渗透压、pH及内毒素检测，确保无细菌、真菌、支原体及病毒污染。

| HyCyte^®干细胞专研一步冻存液 冻存流程

（1）常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于离心管中。

（2）按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的大小计算所需冻存细胞数（推荐密度：1×10^6~5×10^6 cells/mL）。

（3）离心收集细胞。（参考离心条件：4℃，250g，离心4~6min）。

（4）彻底弃去上清液，收集细胞沉淀。

（5）加入适量的HyCyte^®干细胞专研一步冻存液（SCCP-R201）于离心管中。轻柔吹打混匀，制成单细胞悬液。

（6）分装至标记好的冻存管中，建议每管1 mL或1.5 mL。

（7）立即将冻存管直接置于-80℃冰箱中（直立放置）完成“一步”冻存操作，24小时后移入液氮或者-80℃长期保存。

| 注意事项

• 冻存细胞重悬后，应尽快移入到-80℃超低温冰箱。为提供复苏存活率，室温放置时间建议不超过5分钟。

• 建议用户在使用本产品冻存原代细胞或敏感细胞前，对所冻存的细胞进行细胞冷冻保存和复苏的测试，确认性能后再进行正式冻存。

• 本品含有DMSO，请佩戴手套操作。使用产品时应注意无菌操作，避免污染。本产品仅用于科研实验，不可用于临床治疗。（如需无DMSO，推荐“HyCyte^®干细胞专用一步冻存液（DMSO Free）” SCCP-A201）

| HyCyte^®干细胞专研一步冻存液 案例

采用小鼠胚胎干细胞（C57BL/N 6 ESC）、人骨髓间充质干细胞Human BMSCs、人脐带间充质干细胞Human UCSCs作为测试细胞株。使用不同冻存液对细胞进行冻存。-80°C冻存一周后复苏，进行复苏存活率的检测。同时，细胞进行传代培养和诱导分化测试。

图1 细胞复苏活率数据

图2 人骨髓间充质干细胞三系分化诱导结果

测试结果：使用干细胞专研一步冻存液冻存的细胞存活率明显较高。经过诱导分化和染色鉴定也显示经过干细胞专研一步冻存液冻存的细胞增殖正常、诱导分化能力强。

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