人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells，简称HUVEC），是从人脐带静脉分离获得的内皮细胞模型，因其易获取、代表性强，被誉为血管研究的“金标准”细胞。从血管新生、肿瘤血管生成，到药物筛选、炎症反应、血栓形成研究……HUVEC的身影遍布心血管、肿瘤、药理等多个研究领域。

细胞名称：人脐静脉内皮细胞系

细胞简称：HUVEC

产品货号：TCH-C406

种属来源：人

组织来源：脐带组织

细胞形态：内皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养体系：内皮细胞培养基础培养基＋5% FBS＋内皮细胞培养添加剂+1% P/S

配套培养基货号：TCH-G406

消化时间：胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚红(胰酶)在37℃消化1-2min。

传代比例：1:2，每2-3天换液一次

倍增时间：48-72 h

培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃

冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存

推荐海星HyCyte®一步冻存液（即用型、无血清、无需程序降温），货号：GUCP-R201

质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性

HUVEC 是典型的贴壁细胞，细胞状态不好时呈现梭形、杂乱的形态，细胞大小不一，增殖也较缓慢。HyCyte®HUVEC呈标志性的铺路石、鹅卵石形态，细胞均匀分布，边界清晰。原代HUVEC在体外生长缓慢，传代系数有限。HUVEC对胰酶高度敏感，必须严格监控消化状态。

状态差的HUVEC细胞

1.复苏

37℃水浴快速解冻，不要等完全融化，还剩少量冰时就取出。细胞复苏后第二天更换以去除残留的DMSO和未附着的细胞，此后每2-3天换液一次。

2.传代

细胞汇合度达到80%-90% 时传代，不要等100% 长满，过度汇合会导致细胞接触抑制，影响后续状态；也不要太早传，HUVEC 对低密度很敏感，建议按照1：2的比例传代。

3.消化

该细胞对胰酶敏感，使用HyCyte®胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%）含酚红（货号：GUTP-R002）在37℃消化1-2min。（不同品牌胰酶不同细胞密度消化时间略有区别，以80%细胞变圆脱落为准，如果消化全部脱离容易出现消化过度，影响细胞状态。）

4.冻存

使用HyCyte^®一步冻存液（即用型、无血清、无需程序降温，货号：GUCP-R201），直接置于-80℃中，24h后转移至液氮。

1. 细胞聚团生长怎么办？

可能是因为培养瓶或培养板亲水性差，血清中促贴壁因子不足，接种时没有吹匀等造成细胞聚团生长，推荐使用HyCyte^®HUVEC细胞专用培养基。本产品可保持HUVEC细胞**的生长状态，有效提高细胞增殖速度。本产品中已包含HUVEC细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于HUVEC细胞的体外培养。

2. 细胞形态异常、变成梭形

可能是因为接种密度低、培养基不合适、消化过度、传代太高等造成细胞形态异常，建议提高接种密度，更换HyCyte^®HUVEC细胞专用培养基，同时缩短消化时间，镜下监控。

3. 细胞生长缓慢、增殖差

可按照血清质量问题，培养基过期，支原体污染，传代过稀，细胞老化的顺序排查细胞生长缓慢的问题。

4. 细胞污染常见特征

常见细胞污染类型及处理方式：

① 细菌污染

肉眼观察：培养基浑浊、发黄、有异味

镜下特征：黑色细沙状颗粒，部分会运动，细胞贴壁能力丧失

处理方式：直接丢弃，彻底消毒

②真菌污染

③支原体污染

④ 黑胶虫污染