小鼠肺癌细胞(LLC)培养要点—海星生物LLC细胞**培养指南,实验效率翻倍

2026-02-03

LLC细胞是一种从C57BL小鼠的肺中建立的细胞系,该小鼠携带由原发性Lewis肝癌植入引起的肿瘤。LLC细胞对1, 3-双-(2-氯乙基)-1-亚硝基脲有抗性,但对甲氨蝶呤敏感。据报道,LLC细胞具有高度致瘤性,可以在C57BL小鼠成瘤,但在小鼠中转移性较弱。LLC细胞在培养瓶中形成多层,但实际上没有融合。LLC细胞鼠痘病毒阴性,被广泛用作转移模型,并有助于研究癌症化疗药物的机制。


细胞名称:小鼠肺癌细胞

细胞别名LL/2 (LLc1); LL/2(LLc1); LL/2; LL2; LLC1; LLC; Lewis lung carcinoma line 1; Lewis lung carcinoma; Lewis Lung Cancer; Lewis-Lung; Lewis Lung;3LL

产品货号TCM-C742

种属来源小鼠

组织来源

疾病特征肺癌

细胞形态上皮样 

生长特性半贴壁生长

培养体系DMEM-H+10%FBS+1%P/S

配套培养基货号:TCM-G742

传代比例:1:2-1:4,每2-3天换液一次

倍增时间48-72 h

培养条件气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃

冻存条件60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存

质量检测细菌、真菌、支原体检测均为阴性


小鼠肺癌细胞(LLC)培养注意要点

1.小鼠肺癌细胞(LLC)培养注意要点:

小鼠肺癌细胞(LLC)半贴壁生长的细胞特性:贴壁能力中等且不稳定培养过程中部分细胞未完全贴壁或贴壁后脱落,游离细胞会与贴壁细胞或其他游离细胞相互黏附,逐渐形成悬浮或半悬浮的细胞团。

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2.小鼠肺癌细胞(LLC)培养注意事项:

① 当细胞融合度达到 70%–80% 时进行传代,融合度过高易导致细胞接触抑制,且消化时易聚团。

② 消化控制:LLC细胞贴壁能力中等,消化时间过长易导致细胞损伤,过短则消化不充分,需镜下实时观察。

③ 吹打力度:轻柔吹打,避免产生大量气泡,气泡会影响细胞贴壁和增殖。

④ 试剂温度:胰酶、培养基、PBS 使用前需预热至 37℃,避免低温刺激细胞

血清质量差异可能引起细胞状态变化,建议选用高质量的胎牛血清。

3.LLC细胞在培养阶段出现聚团现象处理办法:。

① 轻微聚团,可重新消化:弃去培养基,PBS润洗后,胰酶消化时间比常规延长0.5min,吹打时增加1–2次轻柔吹打。

②若聚团严重,可通过沉降的方式去除聚团细胞,细胞正常消化收集至15mL离心管内进行离心,离心后去除上清,使用约2mL完全培养基重悬细胞。重悬后竖直离心管静置5-10min,取上方1.5mL左右细胞悬液(细胞团较大沉降速度较快)镜下观察是否为单颗细胞,如单颗细胞占大部分即可接种回培养器皿。如有大量细胞团可再进行沉降后取上方细胞悬液。
4.使用HyCyte®   0.1%明胶溶液来包被T25培养瓶,从而使细胞较好地贴壁,具体步骤如下:
① 使用2-3 mL的HyCyte® 0.1%明胶平铺T25瓶底面即可;

37℃培养箱内包被0.5 h;

包被结束后吸去明胶0.1%明胶;

晾干包被的器皿后再使用。

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